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生物药表征——二硫键

生物药表征——二硫键

  • 所属分类:生物药表征
  • 浏览次数:
  • 发布日期:2022-04-12 11:18:57
  • 产品概述
  • 案例解析

二硫键disulfide bond)是连接不同肽链或同一肽链中两个不同半胱氨酸残基巯基的化学键。二硫键是比较稳定的共价键,在蛋白质分子中,起着稳定肽链空间结构的作用。二硫键数目越多,蛋白质分子对抗外界因素影响的稳定性就愈大。

二硫键(S-S键)是通过蛋白质中两个半胱氨酸上的巯基 (-SH) 氧化而形成的,是重要的蛋白质翻译后修饰形式。蛋白质通过各种链间和链内的半胱氨酸连接在一起,这对蛋白质分子保持正确的高级结构,维持蛋白质的生物活性至关重要。抗体药物中二硫键的排布是对药物结构特性的一种反映,因此二硫键连接形式的确认在抗体药物结构确认过程中具有非常重要的作用。现代质谱技术因其操作简单、分析快速、灵敏度较高等优点成为二硫键分析的重要手段。



实验仪器


Q Exactive HFX质谱仪



实验原理及检测方法



结合蛋白质溶液内的非还原酶解,采用nanoLC-MS/MS检测,对样品的二硫键配对方式进行分析,明确样品的各种链内和链间二硫键配对方式,并提供确定这些二硫键配对方式的实验证据,包括一级和二级质谱数据等。

结果展示


所检测的样品是蛋白质或多肽类样品,测量的是二硫键所在多肽分子的分子量,测定的是该多肽分子的氨基酸序列和二硫键配对方式。



样品要求

图片


样品浓度及纯度:蛋白纯度>95%;总质量500ug以上,浓度1mg/ml以上。


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